微生物检测流程总结（精选3篇）

微生物检测流程总结 篇1

1. “菌株的传代次数不得超过5代”表示菌株传代只能传递到第四代，使用第四代时意味着菌株已经是第五代，因此，传代记录中不能显示传5代。

2. 标准菌株确认工作是否齐全：存活性确认，纯度确认，菌落形态、染色镜检及生化反应进行确认。

3. 菌种保藏所用的冰箱是否经过确认，是否容易结霜，且保存菌种（尤其是特异菌株）是否采用两种以上的方式，防止意外流失。

4. 培养基的适用性检查：

微生物限度检查中培养基适用性检查：在注重回收率达到70%时，是否确保检查用培养基上的菌落形态同对照培养基上一致。

控制菌检查中培养基适用性检查：促生长能力----最短培养时间内长出相应的菌落；抑制能力-----最长培养时间下不得有菌生长；细菌培养时间：18-24-48小时；真菌培养时间：24-48-72小时，促生长取最短时间，抑制取最长时间。因此供试品在检查时，培养时间应取最长时间。

环境监测的培养基适用性检查：“中国药典附录：药品微生物实验室规范指导原则”中规定：用于环境监测的培养基须特别防护，最好是双层包装和终端灭菌。如果不能采用终端灭菌的培养基，在使用前应进行100%的预培养避免假阳性出现。同时做促生长试验，防止假阴性出现。

沉降菌监测所用培养基的适用性检查：

①培养基回收率确认（同微生物限度检查的培养基适用性检查）；

②确认培养基放置最长时间，在标准风速下，一般不宜超过2小时；

③同时确认温度、湿度及风速对培养基放置的影响。

5. 洁净区微生物监控标准的理解是否到位？如何计算平均值。

6. 生产抗生素的洁净区进行环境监测，其培养基是否添加有中和剂，如亚硫酸氢钠、聚山梨酯等。

7. 洁净室是否使用消毒剂与杀孢子轮滑使用，杀孢子剂一般半月1次（建议）

8. 无菌检查：

在结果进行观察时，最好将集菌器置于黑白背景下观察，确保不能因灯检原因而出现假阴性。 无菌检查结果判断：

集菌器出现浑浊，但证明不是微生物，判供试品符合规定；

以下情况可证明无菌检查结果无效：设备及环境微生物监控结果不符合规定；回顾无菌试验过程，发现有可能引起微生物污染的因素（阴性对照失败、培养基的灵敏度试验失败等）；供试管中生长的微生物经鉴定后确认是物品或无菌操作技术所引起。此时可以提出复验申请，复验取样条件： ①尽可能使用原样品（全检量的2-3倍）

②尽可能使用与第一份来源相同的另一份样品（如理化检验样品）

③尽可能在同一处重新取样

9. 超净工作台及生物安全柜中不能使用酒精灯：酒精灯的使用会导致局部温度对流，在生物安全柜中则会造成洁净气流紊乱，从而将台面污染的灰尘或者周围污染的`空气带入到无菌操作区，从而污染样品；另外超净工作台中放置酒精灯，洁净风是超外吹的，对流空气中污染的菌可能对操作人员造成伤害。

10. 实验室进行调查：一般将重分析、重检验、重取样同时进行，可以节省调查时间，延缓车间库存时间。

11. 制药用水中生物膜（生物膜形成微生物生长的物理和化学屏障。不仅增加了微生物对热、各种药物、杀菌刺、去污剂和清洁剂的抗性；而且，有利于微生物捕获营养物质。加速生长繁殖。）出现的可能现象：①在同一或同几个监测点多次检测均出现菌落；②菌落的种类多样，形态多样；

措施：采用大量冲洗、化学消毒如次氯酸钠、二氧化氯等其他办法。

微生物检测流程总结 篇2

前言：病原微生物感染引起发病，院内感染不断增加。细菌由于人类不断婪用抗菌药物，耐药性不断增加，这些都严重危害人类健康。病原微生物在实验室潜在对实验室人员的威胁也日趋严峻。生物安全的宣教必不可少，怎样把只有基本微生物知识的学生，与临床实验室大量面对病人标本的采集、运送、接种、培养、观察、鉴定、药敏、报告等各个环节的实践结合起来，由基础知识向专业技能有效转化，把基础理论知识在实习中有效发挥，与实践相结合使之升华，是培养合格检验人才的关键。现就微生物室的实习带教体会总结如下。

1、重视标本送检前的质量控制。

微生物实验室每天都收到来自病房，门诊病人送检的大量标本，有痰、中段尿、伤口分泌物、生殖道拭子、血培养、脓液、术中临时所采集的标本等等。标本的采集、运输和处理是否得当及时对试验结论有直接影响。是分析前质量控制的重要环节，只有让学生全面认识标本采集与处理的全过程及影响因素，才能确保检验结论的准确性、有效性。

1.1标本的采集

例如中段尿的采集，应告知学生尿道内是人体无菌的腔道，尿道外则是有菌的部位。所以采集中段尿时必须对外阴进行彻底消毒，排出前一段尿液，以便冲洗外尿道或外阴，留取中段尿于无菌杯中送检。如痰标本的采集，应嘱病人于清晨嗽洗口腔，咳出深部的痰液于无菌杯中送检，如是支原体和衣原体的检测，则应留取女性宫颈拭子或男性尿道拭子，因为支原体和衣原体都只寄生在宫颈或者尿道的柱状上皮细胞内。

1.2标本的处理

学生应知道，标本的及时处理接种对微生物的成活率至关重要，例如淋病奈瑟氏菌，需要保温，保湿送检，提倡床边接种，培养基应先预温，接种后放36℃温箱、5%co2环境，保湿培养。又如痰标本应接种在血平板，巧克力平板，沙基，嗜血流感巧克力平板上，血平板和巧克力平板主要观察病人痰标本里的基础菌群的生长状态。沙基主要观察是否有念珠菌生长，嗜血流感巧克力平板主要是观察是否有嗜血流感杆菌属的生长，此平板在配制时加入了针对性抗菌药物，能够抑制革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性球菌的生长，只适合于嗜血杆菌属的生长。学生应学会每一份标本，接种到相应有用、有目的、有选择的培养基中。

2、注重特征、综合分析

细菌的鉴定是运用所学知识，综合性判断的过程。它需要根据病人基本信息，标本来源、诊断、平板上形态特征，生长情况，氧化酶、触酶阴阳性状、革兰氏染色镜下形态，生化反应，药敏结果等进行综合性判断，最终得出鉴定结果。我们在带教过程中应根据以上信息，逐项分析，深入浅出，理论联系实际，把学生在课堂中所学知识调动出来，温故知新，对病人标本的状况加以充分阐述，循序渐进，循循诱导。加深学生在视觉、听觉、嗅觉的印象。例如革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性球菌在血平板，巧克力平板是有区别的。革兰氏阴性杆菌在平板上菌落直径较大，约3—5mm，突起、圆形，湿润、有光泽感，我把它比作面包。革兰氏阳性球菌，在平板以上菌落直径较小，约2—3mm，较前者小、圆形、湿润。有光泽感，但不如前者，贴平板生长，我把它比作饼。一包一饼就简单易记地把革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性球菌区分开来。使细菌菌落生活化，形象化，易于记忆。如铜绿假单胞在平板上菌落边缘不整齐，有绿色素，菌落边缘向外延长，培养时间越长菌落越大，有特殊的芳香气味。学生通过芳香气味等以上特征，进一步识认了铜绿假单胞菌。在常见的病人标本中，所检出的细菌菌落都具固有的特征和性状，就像人与人之间通过性格，特征就能区分开来。我们也应该把各种细菌在平板上的菌落特征加以描述，学生就较易接受学懂。

3、培养学生自学能力和动手能力。

专科和本科的学生在微生物室的实习时间大约有八至九周。

在第一周，会安排学习培养基的制备，在此期间学习微生物室常用培养基的.制备，如巧克力平板、SS平板、麦康凯平板、药敏平板、营养琼脂平板、淋基平板、肉汤管、双糖管、TCBS平板、4号琼脂平板等的制备过程。带教老师将边带边放手让学生自己做一些基本的操作，如消毒平板、配制培养基，天平称量，复溶琼脂加血，倒平板等基本功的操作。

第二周学习梅毒初筛，确证试验和血清学的一些试验，也将学习衣原体、支原体的检测方法。

第三到九周将学习细菌的鉴定。用一至两周时间学习各类标本的接种，平板的选择，平板分区划线，熟练掌握接种的流程。

第五周开始学习各类细菌的生化鉴定和药敏试验。带教老师应结合平板上菌落形态。镜下革兰氏染色结果，各类平板上生长情况，病人的基本资料，诊断，本标来源等基本信息分析评述给学生听，逐步推论出细菌的大致方向，正确引导学生的思路。学生在每天应对比较常见而且较有意义的细菌进行鉴定，做生化反应及药敏试验。

通过四周自己动手操作，能对临床上常见的细菌有一定的认识，能把菌鉴定到种。通过实践提高学生的动手能力，熟练掌握细菌室的基本操作技能。深化理论知识，使到理论与实践融会贯通。提倡学生多提问，有疑问老师及时解答与学生的学习相动。

微生物检测流程总结 篇3

第一个实验是菌落总数测定。让我重新认识了一下这个名词：菌落形成单位，我现在的理解就是：1ml或者1g待测样品中菌落的个数，一定要注意的是单位是CFU/ml或CFU/g。还有就是要掌握好对高压蒸汽灭菌锅的操作。实验之前要充分做好预习工作，以便实验的进行。由于是测定微生物实验，就要尤其小心其他杂菌的混入影响实验结果。因此要做好实验仪器和各种试剂的灭菌，有培养皿，试管，移液枪头（装在盒子中），按要求配置好的琼脂培养基和生理盐水，按各自要求用纱布和报纸包扎好，送入高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。玻璃仪器在包扎前要进行清洗，并烘干，以免水分沾湿报纸。灭完菌后取出物品进入超净工作台，超近工作台的紫外灯在进入20分钟前开启，并在进入时关闭，以免影响人体。要对台面进行消毒处理，用酒精擦拭。可以在等待琼脂培养基冷却到50摄氏度左右前对待测样品进行10倍系列稀释至需要的浓度。要注意的是一定要标记好浓度或者按顺序排列在试管架上以免弄混，同一个试管里吸取样能用同一个枪头进行移液。再进行平板接种。待琼脂培养基冷却好后，用右手打开纱布并将锥形瓶拿住，将瓶口靠近酒精灯再进行灭菌，左手拿培养皿用大拇指和食指稍微打开培养皿盖，将琼脂培养基倒入培养皿中心内，不用倒很多，使琼脂培养基没过培养皿表面即可。培养皿一定是平拿在手上的，倒好后轻轻盖上培养皿盖，缓慢地平方在超净工作台台面边缘处，再推至中间。再用移液枪取1ml样品快速打入培养皿中央，盖上培养皿盖，然后用手轻轻摇晃，千外不要太大力。然后贴上标签记号，静置。如此依次操作下去。静置一段时间待培养基凝固后倒置放入恒温培养箱培养一段时间再取出进行观察计数。

我们组的实验结果不甚理想，培养皿中的微生物都是连成一片的，或者是培养皿壁上也都长着，主要是由于待测样品打入培养皿后，摇晃不均匀或者太大力了，以至于菌液没分散开来或是跑到培养皿壁上去了。

第五个实验是自主设计实验环境因素对微生物生长的影响。选取3个环境因素物理、化学和生物因素均可进行设计。根据前四个实验的基础，通过小组探讨和交流设计出实验方案。并加以验证。通过自主设计实验可以结合小组的智慧，加强团队协作精神和创新思维，通过实验可以验证理论，增加感性认识，培养独立工作能力和思考能力，并使具有过硬的专业技术水平。

通过这次的实验，我明白了任何事情丢不是一蹴而就的，而是一个慢慢积累的过程。虽然实验结果不是很理想，但是我参与了过程，通过小组讨论我们也分析了失败的原因，找到了解决的方法，避免了下一次失误。并且从中理解了团队讨论和合作的重要性。以上即是我的全部感想。