适用场景:幼儿园美术教学准备、儿童创意活动设计
本文要点:运用石子拼摆图形、使用橡皮泥粘贴固定、开展作品分享交流
行文逻辑:观察石头→拼摆尝试→欣赏作品→粘贴添画→分享交流
活动名称:石子画
活动目标:
1. 根据自己的意愿进行创作,提高想象力,动手能力及创作能力。
2. 拓展想象的空间,运用拼摆的技能进行创作。
活动准备:
1、 各种石子若干。
2、 橡皮泥。
3、 幼儿用书“小石子”
4、 水彩笔。
活动过程:
一、 出示石头,尝试拼摆,激发幼儿兴趣
1、从不同角度观察石头,进行石头的创意想象
今天,小石子来和咱班小朋友们做游戏。
(1) 教师出示一块石头,引导幼儿观察。
教师:小朋友们来看看这块石头像什么?
(2) 教师再出示一块石头,引导幼儿再看一看,这块石头又像什么?
那么把两块石头拼一起又像什么呢?
2、出示幼儿用书中操作卡上的石头,幼儿尝试操作拼摆
教师:你们的想法真棒!老师这里有一些小石子卡片,我们来摆一摆,看看谁有创意。
二、 出示ppt,欣赏石子组画。
(1)你们的拼摆作品真有创意,老师这里也有一些作品,我们来看一看!
(2)教师:“你们刚才都看到了什么?你们是怎么看出来的?”
三、 出示真实石头,幼儿拼摆发现连接方法。
1、出示真实石头,提出拼摆要求。
(1)先想好自己想要拼什么图形,需要几块,再来选择适宜形状的石头。
(2)不要争抢,别人拿了你想要的,就换一块也可以。
2、幼儿操作,教师巡回指导。
3、部分幼儿拼摆完成,选择一名幼儿的作品进行点评。
(1)教师:看看他的作品真有创意,可是我想拿给大家看却拿不起来怎么办呢?幼儿讨论。
(2)幼儿说出各种工具,教师进行试验,发现橡皮泥粘贴最方便。
4、运用橡皮泥进行石子粘贴并添画,教师巡回指导。
四、 作品分享。
教师:大家可以互相看一看别人的作品是什么东西哦!
适用场景:生物实验操作指导、分子生物学实验准备
本文要点:trizol试剂裂解细胞、甲基绿吡罗红染色鉴定、rna纯化沉淀处理
行文逻辑:制备匀浆→提取rna→定性试验→观察结果
实验原理:
根据成熟雌蟾蜍体内含大量卵细胞且可以方便获取,细胞内含核酸丰富,没有其它组织器官等的干扰等优点以确定蟾蜍卵细胞为实验所需的真核细胞。通过trizol溶液中变性剂破碎真核细胞,然后经过氯仿等有机溶剂抽提rna,再利用rna不溶于异丙醇的性质将自身析出,达到分离提纯的目的。
trizol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全抑制rna酶活性,因此trizol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源rnase(rna酶)。0.1%的8-羟基喹啉可以抑制rnase,与氯仿联合使用可增强抑制作用。异硫氰酸胍属于解偶剂,是一类强力的蛋白质变性剂,可溶解蛋白质并使蛋白质二级结构消失,导致细胞结构降解,核蛋白迅速与核酸分离。β-巯基乙醇的主要作用是破坏rnase蛋白质中的二硫键。
甲基绿―吡罗红为碱性染料,它分别能与细胞内的dna、rna结合呈现不同颜色。当甲基绿与吡罗红作为混合染料时,甲基绿与染色质中dna选择性结合显示绿色或蓝色;吡罗红与核仁、细胞质中的rna选择性结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用,同时两种核酸分子都是多聚体,而其聚合程度有所不同。甲基绿易与聚合程度高的dna结合呈现绿色。而吡罗红则与聚合程度较低的rna结合呈现红色(但解聚的dna也能和派洛宁结合呈现红色)。即rna对派洛宁亲和力大,被染成红色,而dna对甲基绿亲和力大,被染成绿色。09419
实验材料:
(一)试剂
甲基绿―吡罗红染料:①染色剂a液的两种配制方法
第一种方法:取吡罗红甲基绿粉1g,加入到100ml蒸馏水中溶解,然后用滤纸过滤,将滤液放入棕色瓶中备用。
第二种方法:取甲基绿2g溶于98ml蒸馏水中,取吡罗红g5g溶于95ml蒸馏水中。取6ml甲基绿溶液和2ml吡罗红溶液加入到16ml蒸馏水中,即为a液,放入棕色瓶中备用。(注意:用于核酸染色的是吡罗红g,请不要错买吡罗红b。)
②染色剂b液的配制方法b液是一种缓冲液,由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠16.4g,用蒸馏水溶解至1000ml备用;再取乙酸12ml,用蒸馏水稀释至1000ml备用。取配好的乙酸钠溶液30ml和稀释的乙酸20ml,加蒸馏水50ml,配成ph为4.8的b液(缓冲液)。
③染色剂的配制染色剂是由a液、b液混合配制而成的。取a液20ml和b液80ml混合,就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。应该注意的是该试剂应现配现用。
2.trizol试剂(invitrogen公司购买)
3.75%乙醇
4.氯仿
5.异丙醇
6.nacl(0.14m/l)
(二)器材
1.离心机(3000r.p.m)
2.冰浴
3.研钵
4.烧杯
5.量筒
6.试管
7.玻棒
8.胶头滴管
9.离心管
10.天平
实验方法:
制备匀浆:
以班级为单位,称取大概10g蟾蜍卵细胞(2~3℃保存),于研钵(可置于冰浴锅上)中,根据10~30mg组织细胞加1mltrizol试剂的`量加入其中,快速研磨,制备匀浆。实验二人合作为一组,每组取大概10ml匀浆。
rna的提取:
取回匀浆后,室温静置10min,使样品充分裂解――离心(3000r.p.s)20mins――取上清液移至新的离心管――加1/5trizol溶液体积氯仿――在手中反复振荡摇匀,室温静置10min。――离心20mins――取上清液――在上清中加入等体积冰冷的异丙醇,室温放置10min。――充分混匀,静置10minute――离心20min――沉淀用75%乙醇洗涤两次
定性试验:
取2支干净试管,一管加入1.5mlrna溶液(将rna颗粒状的沉淀溶于
2ml0.14/nacl溶液中),另一管加入蒸馏水1.5ml,像两管中加入3m甲基绿-吡罗红染色剂,溶液变成红色为阳性反应。
实验结果:
利用trizol法可成功提取的rna,并使得甲基绿-吡罗红染色剂显红色。
实验注意事项:
trizol对人体有害,使用时应戴一次性手套,注意防止溅出。
由于本科生实验室里的为普通离心机,转速不高,故可适当延长离心时间。
离心后,注意上清液和沉淀的取舍以及对rna层的小心吸取,否则将导致rna样品中有dna污染。